NEFA Assay Kit es una herramienta para la cuantificación de NEFA

Kit de ensayo NEFA es una herramienta para la cuantificación de NEFA (Óxido Nítrico). Se utiliza para determinar la concentración de NEFA en muestras de sangre o tejido. NEFA es un nutriente vital que es responsable de la regulación del metabolismo energético, la excitabilidad cardíaca, la conducción neuromuscular, la presión arterial y la coagulación de la sangre. Se encuentra principalmente en huesos, músculos, tejidos blandos y glóbulos rojos.

Preparación

NEFA es una proteína pequeña de 50,2 kDa que tiene la capacidad de unirse al ADN. Es un complejo citosólico de ácido graso sintasa (FAS) tipo I que produce ácido palmítico no esterificado. En presencia de Acil-CoA oxidasa (ACS), el complejo FAS oxida la 3-metil-N-etil-N-(b-hidroxietil)-anilina a 4-aminoantipirina, que es el precursor molecular de la acetil-CoA. Este proceso es un proceso enzimático crucial para todos los organismos eucariotas.

Aunque NEFA puede no tener la gran masa de una grasa, es una importante fuente de combustible para los tejidos periféricos. Se metaboliza en el hígado y se transporta complejado con albúmina a los tejidos periféricos. NEFA también es liberado por un dominio de tioesterasa (TE) del complejo FAS.

pipeteo

Los kits ELISA se utilizan para detectar pequeños compuestos químicos, proteínas y péptidos. Estos kits se basan en proteínas recombinantes expresadas en E.coli. Los kits no contienen azida, timerosal ni otros recursos naturales.

En el kit hay reactivos como BSA, tampón de dilución libre de pirógenos y solución de lavado. La solución de lavado es estable durante dos semanas a 2-8 °C. El tampón de dilución contiene solución salina fisiológica al 0,9 %.

El kit tiene un estándar NEFA interno. Esto se enriquece con NEFA a una concentración que coincide con la concentración esperada en la muestra. Se mide la absorbancia del pigmento azul-púrpura a 546 nm para calcular la concentración de NEFA en la muestra.

colorimétrico

El uso del kit WAKO NEFA ha provocado una variedad de resultados, incluidos algunos que no tienen sentido. Sin embargo, el kit NEFA es un competidor digno cuando se trata de determinar el contenido relativo de ácidos grasos de muestras de tejido animal. Como tal, el kit NEFA es una de las pruebas de laboratorio más populares. El kit viene con instrucciones para analizar diferentes tipos de muestras, que incluyen sangre, suero, saliva y una variedad de lípidos.

La parte más emocionante del kit es que se puede usar para medir una variedad de ácidos grasos, incluidos los que se encuentran comúnmente en los lípidos. El kit viene con una gama de enzimas diseñadas para detectar una variedad de ácidos grasos, incluidos los ácidos grasos C-8 y C-16 que se encuentran en humanos y animales. Sin embargo, no se recomienda el uso del kit en concentraciones de FFA de alta precisión en un amplio rango.

electroquímico

Los NEFA son ácidos grasos importantes para la salud humana, pero rara vez se evalúan. Además, su detección es muy costosa. Por lo tanto, monitorear los cambios en sus concentraciones puede ayudar a una prevención y manejo de enfermedades más precisos. En este estudio, se desarrolló un kit de ensayo electroquímico para NEFA utilizando PDA-MWCNT como superficie del sensor. Este electrodo exhibió una buena actividad electrocatalítica para los pasos de oxidación de NEFA y podría usarse en aplicaciones de la vida real.

El electrodo de enzima constaba de una película compuesta multicapa de PDA-MWCNT y ACOD, ACS y polímero. El orden de las capas se eligió para que coincidiera con el orden de la reacción enzimática. Se determinó que ACS y ACOD permanecieron biológicamente activos en la película.

Concentración de NEFA en T2D

Las concentraciones de NEFA en la sangre se han estudiado en el contexto de la obesidad y la hipertensión. Se ha demostrado que estos compuestos promueven la elevación de la PA a través de la estimulación a1-adrenérgica y aumentan el estrés oxidativo. Los NEFA también están asociados con el síndrome metabólico. Estos compuestos pueden ser importantes en el desarrollo de la hipertensión.

Se han propuesto varios modelos para describir la respuesta de NEFA en plasma a una prueba de glucosa intravenosa. El modelo de Boston representó con precisión la cuarta fase del aumento de la concentración de NEFA. Sin embargo, el modelo no describió la fase de latencia inicial. El modelo de Fabian empleó una pendiente exponencial simple para describir esta fase. De manera similar, el modelo de Thomaseth no pudo describir la fase de rebote.

Niveles de NEFA en triglicéridos

Varios estudios han investigado los efectos de la cirugía bariátrica en la composición de NEFA en plasma. En un metanálisis publicado en 2016, los niveles séricos de NEFA disminuyeron a los 6 y 12 meses después de la cirugía. Esto puede deberse a la reducción de los niveles de insulina. En otro estudio, los NEFA plasmáticos se midieron en un grupo de pacientes obesos antes y después de la cirugía de derivación gástrica en Y de Roux.

Las concentraciones de siete NEFA se redujeron a los 9 meses después de la cirugía. El linoleato (un ácido graso omega-6) se redujo en 18:2, el estearato en 18:0 y el oleato en 16:0. Sin embargo, la concentración de docosahexaenoato no se vio afectada. Los NEFA se convirtieron en ésteres metílicos de ácidos grasos (FAME). Luego se analizaron mediante cromatografía de gases-espectrometría de masas (GC-MS).